TCVMA 159-2024 猪链球菌通用型与2型双重TaqMan实时荧光PCR检测方法

摘要：本文件规定了猪链球菌通用型与2型双重TaqMan实时荧光PCR检测方法的原理、试剂与材料、仪器设备、样品处理、检测步骤、结果判定及性能验证。本文件适用于猪链球菌的快速检测和鉴别，可应用于临床样本、动物样本及相关环境样本的检测。
Title：General and Serotype 2 Dual TaqMan Real-time Fluorescent PCR Detection Method for Streptococcus suis
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：07.100.99

在TCVMA 159-2024《猪链球菌通用型与2型双重TaqMan实时荧光PCR检测方法》中，一个显著的变化是引物和探针的设计优化。这一改进直接关系到检测灵敏度和特异性的提升。以探针设计为例，新版本标准采用了更长的荧光标记探针，并调整了其序列，使其能够更好地与目标基因结合。

以探针应用为例，在实际操作过程中，首先需要确保探针的质量符合要求。通常情况下，探针应储存于-20℃环境中，并且每次使用前需短暂离心以保证液体集中在管底。在反应体系中加入探针时，应当缓慢操作避免气泡产生，因为气泡可能会影响荧光信号的准确性。

当进行实际检测时，可以按照以下步骤实施：首先制备标准品和样品DNA模板，然后配置反应混合液，将引物、探针以及其它必要成分按比例混合均匀后分装至反应管中，最后加入DNA模板启动PCR扩增程序。在整个过程中，要特别注意控制好退火温度和时间，这对于保证探针与靶标序列的有效结合至关重要。

通过这样的改进措施，不仅提高了检测结果的可靠性，还增强了对不同样本类型的适应能力，从而为临床诊断提供了更加精准的技术支持。