DB37T 4052—2020 小反刍兽疫恒温扩增检测技术规范

小反刍兽疫是一种严重危害山羊和绵羊的急性传染病，DB37/T 4052—2020《小反刍兽疫恒温扩增检测技术规范》为该病的快速检测提供了标准化依据。以下对标准中的重要条文进行详细解读。

一、适用范围

本标准规定了利用环介导等温扩增技术检测小反刍兽疫病毒的方法，适用于养殖场、屠宰场、动物防疫监督机构等场所对小反刍兽疫病毒的检测。

二、术语和定义

1. 环介导等温扩增（LAMP）：一种在恒定温度下进行核酸扩增的技术，具有操作简单、反应迅速的特点。

2. 小反刍兽疫病毒（PPRV）：引起小反刍兽疫的病原体，属于副黏病毒科麻疹病毒属。

三、试剂与材料

1. 恒温扩增试剂盒：应符合相关国家标准要求，确保试剂的质量稳定性和检测灵敏度。

2. 阳性对照品：采用已知浓度的小反刍兽疫病毒核酸样品，用于验证检测系统的有效性。

3. 阴性对照品：使用无核酸污染的纯水或缓冲液，用于排除实验过程中的非特异性扩增。

四、仪器设备

1. 恒温扩增仪：能够精确控制温度，保证扩增反应在设定的条件下进行。

2. 荧光检测装置：实时监测扩增产物的荧光信号变化，判断扩增结果。

五、样品采集与处理

1. 样品类型：包括鼻拭子、眼拭子、口咽拭子、肺组织等。

2. 样品保存：采集后的样品应立即置于低温环境中保存，并尽快送至实验室检测。

3. 样品处理：将样品加入裂解液中充分混匀，离心后取上清液作为检测样本。

六、检测步骤

1. 反应体系配制：按照试剂盒说明书的要求配制反应混合物，加入模板DNA和引物。

2. 扩增反应：将配制好的反应体系放入恒温扩增仪中，设置反应温度和时间。

3. 结果判定：观察荧光信号的变化情况，根据阈值确定是否扩增成功。

七、结果判定

1. 阳性：出现明显的荧光信号，表明样品中含有小反刍兽疫病毒核酸。

2. 阴性：未出现荧光信号，表明样品中不含小反刍兽疫病毒核酸。

3. 无效：阴性对照品出现荧光信号或阳性对照品未出现荧光信号，需重新检测。

八、质量控制

1. 每次检测均需设立阳性和阴性对照品，确保检测结果的可靠性。

2. 定期对仪器设备进行校准和维护，保证检测数据的准确性。

3. 实验人员应经过专业培训，熟悉检测流程和技术要求。

通过严格执行DB37/T 4052—2020《小反刍兽疫恒温扩增检测技术规范》，可以有效提高小反刍兽疫的检测效率和准确性，为防控该病提供科学依据。