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摘要:本文件规定了禽腺病毒4型荧光定量PCR检测的原理、试剂与材料、仪器设备、样品处理、检测步骤、结果分析及报告。本文件适用于禽腺病毒4型的快速检测和诊断。
Title:Detection method of Fowl Adenovirus Type 4 by Real-time Fluorescent PCR
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:65.020
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拓展解读
DB37/T 4044—2020《禽腺病毒4型荧光定量PCR检测方法》是一项山东省地方标准,用于指导禽腺病毒4型的快速检测。以下是对该标准中一些关键条文的详细解读。
范围
标准适用于禽腺病毒4型的特异性检测。此范围明确了标准的应用领域,确保其在特定类型的病毒检测中发挥作用。
规范性引用文件
标准引用了GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法等相关文件。这些引用文件为检测提供了必要的技术支持和参考依据,保证了检测过程的专业性和准确性。
术语和定义
标准对“禽腺病毒4型”进行了明确界定,指出这是一种能够引起禽类疾病的病毒类型。这一定义有助于使用者准确理解所涉及的对象。
原理
标准描述了利用荧光定量PCR技术扩增特异性靶序列,并通过荧光信号监测反应进程的原理。这种方法可以精确地量化样本中的病毒载量,提高检测效率。
试剂与材料
标准规定了所需试剂的具体成分及配制方法,包括但不限于DNA提取试剂盒、引物探针混合液等。正确选择和使用这些材料是获得可靠结果的基础。
仪器设备
要求使用的仪器设备需满足一定的精度要求,如实时荧光定量PCR仪、微量移液器等。这一步骤强调了硬件条件的重要性,以保障实验操作顺利进行。
样品采集与处理
详细说明了样品采集的时间点、部位以及保存方式等内容。合理的样品管理对于后续分析至关重要,能有效避免因不当操作导致的数据偏差。
操作步骤
从核酸提取到扩增反应再到数据分析,整个流程都被细致地列出。每个环节都需严格按照规程执行,特别是引物浓度、退火温度等参数的选择直接影响最终结果的质量。
结果判定
根据Ct值判断是否阳性,同时结合内参基因表达情况综合考量。这种双重验证机制提高了检测结果的可信度。
注意事项
提醒操作人员注意个人防护措施,防止交叉污染,并定期校准仪器设备,保持良好的工作环境。这些都是确保实验安全高效开展的重要因素。
以上就是对DB37/T 4044—2020《禽腺病毒4型荧光定量PCR检测方法》部分重要内容的深入解析,希望对你有所帮助。