DB45T 2026-2019 甘蔗DNA指纹图谱采集技术规程

DB45/T 2026-2019《甘蔗DNA指纹图谱采集技术规程》是广西壮族自治区制定的一项地方标准，旨在规范甘蔗品种的DNA指纹图谱采集过程。以下是对该标准中一些关键条款的详细解读：

1. 适用范围

本标准适用于甘蔗品种的DNA指纹图谱采集。这意味着任何涉及甘蔗品种鉴定、保护或管理的工作都可以参考此标准。

2. 术语和定义

- DNA指纹图谱：由多个DNA标记位点组成的独特遗传特征组合，用于识别不同个体。

- 引物：在PCR扩增过程中与目标DNA序列特异性结合的小片段DNA。

3. 样品采集

标准要求从健康植株的新鲜叶片中采集样本，并确保样本无污染。这一规定保证了后续实验数据的准确性和可靠性。

4. DNA提取

提取方法应采用适合植物组织的高纯度DNA提取试剂盒或传统酚-氯仿法。提取后的DNA需满足浓度≥50 ng/μL且OD260/OD280值在1.8至2.0之间。

5. PCR扩增

使用特定设计的引物对进行PCR扩增，确保每个位点都能清晰扩增出预期大小的目标片段。对于每个样本至少需要检测10个以上具有代表性的微卫星（SSR）标记位点。

6. 数据分析

将扩增产物通过电泳分离后拍照记录，并利用专业软件分析条带大小。最终生成每位点的等位基因长度列表作为指纹信息。

7. 结果判定

若两个样本间存在差异，则视为不同品种；若完全一致则可能为同一品种或近亲关系。当出现争议时可增加更多位点验证。

8. 质量控制

实验全程需设立阳性对照（已知品种DNA）和阴性对照（无模板水），以监测整个流程是否正常运行。

9. 档案管理

每次实验的所有原始数据及处理后的结果均需妥善保存至少五年，便于追溯查询。

这些条款构成了一个完整的甘蔗DNA指纹图谱采集体系，不仅提高了工作效率，还增强了结果的科学性和权威性，在实际应用中发挥了重要作用。