DB37T 3894—2020 大白菜芜菁花叶病毒、黄瓜花叶病毒检测技术规程

DB37/T 3894—2020是山东省地方标准，规定了大白菜中芜菁花叶病毒和黄瓜花叶病毒的检测方法。以下是对该标准的重要条文进行解读：

样品采集与处理

标准要求在大白菜的不同生长阶段采集样品，包括苗期、莲座期和结球期。每个时期的样本数量应不少于10株。采集时需注意避免机械损伤，并迅速将样品置于低温条件下保存。

检测方法

# 酶联免疫吸附测定(ELISA)

此方法用于初步筛查。按照试剂盒说明书操作，将提取的植物组织液加入微孔板中，加入特异性抗体后观察颜色变化。阳性反应表明可能存在病毒感染。

# 实时荧光定量PCR

对于ELISA检测呈阳性的样品，进一步采用实时荧光定量PCR确认。通过设计针对芜菁花叶病毒和黄瓜花叶病毒特异性的引物和探针，利用仪器扩增并检测病毒核酸含量。这种方法具有高灵敏度和准确性。

结果判定

当两种检测方法均显示阳性结果时，可判定样品感染了相应的病毒。若仅有一种方法为阳性，则需要重复实验或采用其他验证手段。

注意事项

- 在整个检测过程中，必须严格遵守无菌操作规程，防止交叉污染。

- 不同批次的试剂盒使用前需进行性能验证。

- 定期对实验设备进行校准维护，确保数据可靠性。

以上内容基于DB37/T 3894—2020标准中的关键部分进行了详细阐述，旨在帮助相关人员正确理解和执行该标准。