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摘要:本文件规定了辣椒红中反式辣椒红素含量的测定方法——高效液相色谱法。本文件适用于辣椒红中反式辣椒红素含量的测定。
Title:Determination of Trans-Capsorubin Content in Capsanthin - High Performance Liquid Chromatography
中国标准分类号:X43
国际标准分类号:67.220
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拓展解读
DB13/T 5159-2019 是河北省地方标准,规定了辣椒红中反式辣椒红素含量的测定方法。以下是对该标准的重要条文进行详细解读:
1. 范围
标准适用于辣椒红制品中反式辣椒红素含量的测定。这明确了适用对象为辣椒红及其相关产品。
2. 原理
采用高效液相色谱法(HPLC),通过特定的色谱柱和检测器分离并定量样品中的反式辣椒红素。这一原理确保了测定的准确性和可靠性。
3. 试剂和材料
- 使用正己烷作为溶剂,乙腈作为流动相。这些试剂的选择基于其对反式辣椒红素的良好溶解性和稳定性。
- 色谱柱为C18反相柱,这种柱子能够有效分离辣椒红中的不同成分。
4. 仪器设备
- 高效液相色谱仪:配备紫外检测器,检测波长设定为467nm,这是反式辣椒红素的最大吸收波长。
- 分析天平:精度要求达到0.0001g,以保证称量的准确性。
5. 样品制备
样品需经过精确称量后,用正己烷溶解并过滤,确保进入色谱系统的样品纯净无杂质。
6. 色谱条件
流动相比例、流速及柱温等参数直接影响分离效果。例如,流速通常设为1.0mL/min,柱温控制在30℃左右,这些条件有助于获得良好的峰形和分辨率。
7. 测定步骤
将处理好的样品注入色谱仪,记录反式辣椒红素的保留时间和峰面积。与标准曲线对比计算含量。
8. 结果计算
根据峰面积和标准曲线方程计算出反式辣椒红素的质量分数,最终结果保留两位小数。
9. 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
10. 注意事项
- 实验过程中应避免阳光直射,防止样品分解。
- 定期校准仪器,确保数据准确可靠。
以上内容涵盖了标准的关键部分,旨在帮助理解和应用DB13/T 5159-2019进行辣椒红中反式辣椒红素含量的测定。