DB37T 3112-2018 猪伪狂犬病毒环介导等温扩增检测技术

摘要：本文件规定了猪伪狂犬病毒环介导等温扩增（LAMP）检测技术的原理、试剂与材料、仪器设备、样品处理、检测步骤、结果判定及检测报告。本文件适用于猪伪狂犬病毒的快速检测和诊断。
Title：Detection Technology of Porcine Pseudorabies Virus by Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP)
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：65.020.30

DB37/T 3112-2018 是山东省地方标准，规定了猪伪狂犬病毒（PRV）环介导等温扩增（LAMP）检测方法的技术要求。以下是对标准中关键部分的详细解读：

### 范围与适用性

本标准适用于猪伪狂犬病毒的快速检测，尤其适合于基层实验室和现场检测环境。其目的是通过简便、快速的方法来提高检测效率。

### 原理

LAMP技术利用特异性引物在恒温条件下扩增目标DNA序列。该方法具有高灵敏度和特异性，能够在短时间内完成反应，无需复杂的仪器设备。

### 材料与试剂

标准中列出了所有必需的试剂和材料，包括但不限于：

- LAMP反应混合液

- 正向内引物、反向内引物、正向外引物及副向外引物

- 模板DNA

- 阳性和阴性质控品

这些材料的选择直接影响检测结果的准确性，因此需严格按照标准要求准备。

### 操作步骤

1. **样本处理**：将采集到的样品进行预处理，确保提取出高质量的DNA。

2. **反应体系配置**：按照规定的比例配制LAMP反应液，并加入模板DNA。

3. **反应条件设置**：设定合适的温度（通常为60-65℃）和时间（一般为40-60分钟），启动反应。

4. **结果判定**：通过肉眼观察或使用荧光检测仪判断结果。阳性表现为颜色变化或荧光信号出现。

### 结果分析

- **阳性判断**：当样品呈现预期的颜色变化或荧光信号时，可判定为阳性。

- **阴性判断**：若未见上述现象，则视为阴性。

- **质控检查**：阳性和阴性质控品的结果必须符合预期，否则需重新检测。

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