DB37T 3112-2018 猪伪狂犬病毒环介导等温扩增检测技术

DB37/T 3112-2018 是山东省地方标准，规定了猪伪狂犬病毒（PRV）环介导等温扩增（LAMP）检测方法的技术要求。以下是对标准中关键部分的详细解读：

范围与适用性

本标准适用于猪伪狂犬病毒的快速检测，尤其适合于基层实验室和现场检测环境。其目的是通过简便、快速的方法来提高检测效率。

原理

LAMP技术利用特异性引物在恒温条件下扩增目标DNA序列。该方法具有高灵敏度和特异性，能够在短时间内完成反应，无需复杂的仪器设备。

材料与试剂

标准中列出了所有必需的试剂和材料，包括但不限于：

- LAMP反应混合液

- 正向内引物、反向内引物、正向外引物及副向外引物

- 模板DNA

- 阳性和阴性质控品

这些材料的选择直接影响检测结果的准确性，因此需严格按照标准要求准备。

操作步骤

1. 样本处理：将采集到的样品进行预处理，确保提取出高质量的DNA。

2. 反应体系配置：按照规定的比例配制LAMP反应液，并加入模板DNA。

3. 反应条件设置：设定合适的温度（通常为60-65℃）和时间（一般为40-60分钟），启动反应。

4. 结果判定：通过肉眼观察或使用荧光检测仪判断结果。阳性表现为颜色变化或荧光信号出现。

结果分析

- 阳性判断：当样品呈现预期的颜色变化或荧光信号时，可判定为阳性。

- 阴性判断：若未见上述现象，则视为阴性。

- 质控检查：阳性和阴性质控品的结果必须符合预期，否则需重新检测。

注意事项

执行过程中应注意避免污染，确保实验环境清洁；同时要定期校准仪器设备，保证检测数据的真实可靠。

以上是对DB37/T 3112-2018标准中重要条款的深入解析，希望对理解和应用此标准有所帮助。