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摘要:本文件规定了利用ISSR(Inter-Simple Sequence Repeat)技术进行甘薯品种真实性鉴定的方法,包括样品的采集、DNA提取、PCR扩增、电泳检测及结果分析等内容。本文件适用于甘薯品种的真实性鉴定及品种管理。
Title:Sweet Potato Variety Authentication by ISSR Method
中国标准分类号:B 61
国际标准分类号:65.020.01
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拓展解读
《甘薯品种真实性鉴定 ISSR法》(DB42/T 1438-2018)是一项湖北省地方标准,用于通过ISSR(间简单序列重复)分子标记技术对甘薯品种的真实性进行鉴定。以下将选取标准中的重要条文进行详细解读。
首先,在标准的范围部分明确指出该方法适用于以ISSR标记为基础的甘薯品种真实性鉴定工作。这意味着此方法可以作为判定甘薯品种是否与其申报信息一致的重要手段之一。
其次,在术语和定义部分给出了ISSR标记、引物等专业名词的具体含义。例如,“ISSR标记”被定义为利用特定的引物扩增植物基因组DNA中简单序列重复间的区域所获得的遗传标记。这有助于确保在后续操作过程中使用统一的语言描述。
再者,在技术要求部分强调了实验材料的选择应具有代表性且状态良好,包括但不限于新鲜叶片或块根组织等。同时要求使用的试剂盒性能稳定可靠,并且仪器设备需经过校准并处于正常工作状态。
此外,在样品制备环节特别提到样品处理过程中要防止污染,建议采用液氮研磨等方式快速破碎样本,并及时提取高质量的DNA用于后续分析。
对于ISSR扩增条件,则详细规定了退火温度、循环次数等一系列参数设置,这些参数直接影响到最终检测结果的准确性。标准还推荐使用特定的ISSR引物组合来进行扩增反应。
最后,在结果分析部分指出应根据扩增产物的电泳图谱来判断待测样品与目标品种之间是否存在差异。如果发现明显的差异,则可认为两者不属于同一品种;反之则表明两者可能为相同品种。
综上所述,《甘薯品种真实性鉴定 ISSR法》不仅提供了具体的操作流程和技术细节,而且明确了各个环节的质量控制措施,从而保证了鉴定结果的真实性和可靠性。这一标准对于维护种业市场秩序、保护育种者权益具有重要意义。