DB22T 2788-2017 猫泛白细胞减少症诊断 实时荧光PCR法

DB22/T 2788-2017《猫泛白细胞减少症诊断 实时荧光PCR法》是一项地方标准，用于指导通过实时荧光PCR技术对猫泛白细胞减少症（也称猫瘟）进行准确诊断。以下是对该标准中一些关键条文的详细解读：

范围

标准适用于猫泛白细胞减少症的诊断，规定了使用实时荧光PCR方法检测猫细小病毒（FPV）的具体要求和流程。此方法能够快速、灵敏地检测出病原体，为临床诊断提供科学依据。

规范性引用文件

标准引用了多个相关规范性文件，如GB/T 6682《分析实验室用水规格和试验方法》等。这些文件确保了实验过程中使用的试剂、设备符合国家标准，从而保证检测结果的可靠性和一致性。

术语和定义

- 猫泛白细胞减少症：由猫细小病毒引起的高度接触性传染病，主要表现为呕吐、腹泻等症状。

- 实时荧光PCR：一种分子生物学技术，能够在扩增DNA的同时实时监测荧光信号强度变化，用于定量或定性分析目标DNA的存在。

技术要求

1. 样本采集与处理

- 样本应来源于疑似感染猫只的粪便或其他排泄物。

- 样本采集后需立即置于冰上并尽快送至实验室，以保持病毒活性。

- 样本处理过程中要严格遵守无菌操作规程，防止污染。

2. 试剂盒选择

- 应选用经过验证的试剂盒，确保其特异性和敏感度满足要求。

- 检测前应对试剂盒进行性能测试，包括但不限于扩增效率、线性范围及重复性等指标。

3. 仪器设备

- 实时荧光PCR仪需定期校准维护，确保仪器处于良好工作状态。

- 使用前应检查仪器各项参数设置是否正确，并记录初始条件。

4. 操作步骤

- 提取核酸：按照试剂说明书操作，确保核酸提取质量。

- 反应体系配制：严格按照试剂盒说明书配置反应混合液。

- 扩增程序：设定合适的退火温度、延伸时间等参数。

- 数据分析：根据扩增曲线判断结果，阳性样品需重复验证。

5. 结果判定

- 若Ct值低于阈值且扩增曲线呈典型S型，则判为阳性。

- 对于灰区结果（接近阈值），需重新采样复检。

- 阴性对照必须始终显示阴性，否则此次检测无效。

6. 质量控制

- 设置内部阳性对照和阴性对照，监控整个检测过程。

- 定期参与能力验证活动，评估实验室技术水平。

注意事项

- 实验人员需接受专业培训，熟悉操作流程。

- 实验废弃物应按生物安全规定妥善处理。

- 在实际应用中还需结合临床表现和其他辅助检查综合判断病情。

以上是对DB22/T 2788-2017标准部分内容的重点解读，希望对你有所帮助。