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摘要:本文件规定了犬瘟热病毒检测的荧光定量RT-PCR方法的技术要求、操作步骤和结果判定。本文件适用于犬瘟热病毒的实验室检测与诊断。
Title:Detection of Canine Distemper Virus - Fluorescent Quantitative RT-PCR Method
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:11.100.99
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拓展解读
DB22/T 2782-2017是吉林省地方标准,规定了犬瘟热病毒检测的荧光定量RT-PCR方法。以下为关键条款的详细解读:
标准适用于临床诊断中犬瘟热病毒的检测。其中3.1定义了犬瘟热病毒(CDV)为引起犬科动物高度接触性传染病的病毒。
5.1样品采集部分强调使用无菌容器收集眼鼻分泌物、唾液或粪便样本。这是为了防止外源污染影响检测结果。
6.1试剂准备指出需使用经验证的RT-PCR试剂盒,并确保所有试剂在有效期内使用。试剂的质量直接关系到检测的准确性。
7.1仪器设备要求中提到荧光定量PCR仪应具备温控精确性和高灵敏度。这保证了反应条件的一致性和结果的可靠性。
9.1反应体系建立部分明确各成分用量如反转录酶、引物等的具体参数。正确的体系构建是获得准确结果的基础。
10.1扩增程序描述了退火温度、延伸时间等具体步骤。这些参数的选择直接影响特异性和敏感性。
11.1结果判定标准规定CT值小于38为阳性大于40为阴性,38-40之间需重复实验。这是判断感染状态的重要依据。
12.1质量控制要求设置阴性和阳性对照以确保实验的有效性。缺少对照会增加假阳性和假阴性的风险。
通过以上解读可以看出该标准从样本采集到最终结果判定都做了细致的规定,目的是确保检测过程的科学性和结果的准确性。