GBT 34777-2017 中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达产品残留DNA检测 荧光定量PCR法

GBT 34777-2017标准概述

GBT 34777-2017是中国国家标准化管理委员会发布的关于中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达产品中残留DNA检测的技术规范。这一标准的发布旨在确保生物制品的质量与安全性，特别是在基因工程药物和疫苗生产领域。CHO细胞因其高表达效率和易于培养的特点，被广泛应用于生物制药行业。然而，CHO细胞在生产过程中可能残留于最终产品中，这些残留DNA若未被有效检测和清除，可能引发免疫反应或其他潜在风险。

荧光定量PCR技术的应用

荧光定量PCR（qPCR）是目前最灵敏、准确的核酸检测方法之一。在GBT 34777-2017中，荧光定量PCR被推荐为检测CHO细胞残留DNA的主要手段。这种方法通过特异性引物和探针，能够精准识别并量化目标DNA序列。与传统方法相比，荧光定量PCR具有更高的灵敏度和重复性，能够在极低浓度下检测出残留DNA。

• 检测原理：荧光定量PCR利用TaqMan探针技术，在PCR扩增过程中实时监测荧光信号强度，从而推算出样品中的DNA含量。
• 优势：快速、高效、可定量，适合大规模样本检测。

残留DNA的危害与控制

CHO细胞残留DNA可能带来的危害包括免疫原性和潜在的致突变性。因此，GBT 34777-2017对残留DNA的限量做出了严格规定。例如，对于某些基因工程药物，残留DNA的上限通常设定为每剂不超过10 ng。

• 免疫原性：残留DNA可能诱发宿主免疫系统的异常反应，导致过敏或其他不良事件。
• 致突变性：外源DNA可能整合到宿主基因组中，增加癌症等疾病的风险。

实际应用案例

以某知名生物制药公司为例，该公司在其生产的重组蛋白药物中采用了荧光定量PCR技术来检测CHO细胞残留DNA。通过严格的工艺优化和质量控制流程，该公司成功将残留DNA水平降至每剂低于5 ng，远低于国家标准的要求。这一成果不仅保障了产品的安全性，还显著提升了市场竞争力。

此外，荧光定量PCR技术的应用也促进了生物制药行业的标准化进程。许多企业通过遵循GBT 34777-2017标准，建立了完善的残留DNA检测体系，为全球生物安全作出了重要贡献。